基于细胞活性生物标记物的BCOP方法预测洗发水、沐浴露、洁面类化妆品的眼刺激性

doi:10.3969/j.issn.1001-1803.2021.02.005

日用化学工业 ›› 2021, Vol. 51 ›› Issue (2): 109-114.doi: 10.3969/j.issn.1001-1803.2021.02.005

基于细胞活性生物标记物的BCOP方法预测洗发水、沐浴露、洁面类化妆品的眼刺激性

谢珍(),陈舒怀,刘璐,何立成,桑晶,朱琰琴,匡荣()

浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州 310052

收稿日期:2020-05-12 修回日期:2021-01-21 出版日期:2021-02-22 发布日期:2021-02-23
通讯作者: 匡荣
作者简介:谢珍（1988-）,女,湖北十堰人,主管药师,硕士,电话：（0571）86457970,E-mail： 784733281@qq.com。
基金资助:
浙江省省级公益性技术应用研究计划项目(2018C37122);国家药品监督管理局化妆品动物替代试验技术重点实验室(国药监科外函[2019]82号);浙江省药品接触材料质量控制研究重点实验室(2014E10006)

Prediction of eye irritation of shampoos, shower gel and facial cleansers using Bovine Corneal Opacity and Permeability assay based on biomarkers of cell viability

XIE Zhen(),CHEN Shu-huai,LIU Lu,HE Li-cheng,SANG Jing,ZHU Yan-qin,KUANG Rong()

Zhejiang Institute of Food and Drug Control, Hangzhou, Zhejiang 310052, China

Received:2020-05-12 Revised:2021-01-21 Online:2021-02-22 Published:2021-02-23
Contact: Rong KUANG

摘要/Abstract

摘要：

建立牛角膜浑浊和渗透性（BCOP）结合基于细胞活性生物标记物的荧光染色用于评价化妆品眼刺激性的方法。采用BCOP法对市售的洗发水、沐浴类和洁面类化妆品进行眼刺激性检测,同时对角膜进行冰冻切片并染色,鬼笔环肽对胞内的f-actin（filamentous actin）丝状肌动蛋白进行染色,DAPI染色检测细胞核后,测量损伤深度（depth of injury,DOI）,依据BCOP测试结果、Draize试验结果及DOI,建立预测模型。结果表明,通过DOI检测,可对化妆品轻刺激性和中刺激性进行区分,DOI检测显然能够为眼刺激性分类提供更可靠的依据,适用于化妆品眼刺激性的评价。

关键词: 牛角膜, 化妆品, 眼刺激性, 鬼比环肽, 损伤深度

Abstract:

Methods for evaluating eye irritation potential of cosmetic products using Bovine Corneal Opacity and Permeability assay with the fluorescence staining based on biomarkers of cell viability were established. Ocular irritation were predicted on commercially available shampoos, shower gel and facial cleansers by BCOP assay, then processed for freezing section and staining using phalloidin to detect intracellular f-actin and DAPI staining to detect nuclei, depth of injury （DOI） could be measured. Finally, the predictive models were establish based on BCOP assay, Draize test and DOI. These results suggested that the classification of eye irritation of cosmetic products from mild to moderate level can be distinguished by DOI measuring. Obviously, DOI testing provides a more reliable basis for eye irritation classification, and it is suitable for evaluation eye irritation potential for cosmetic products.

Key words: corneal, cosmetic products, eye irritation, phalloidin, depth of injury

中图分类号:

TQ658

谢珍,陈舒怀,刘璐,何立成,桑晶,朱琰琴,匡荣. 基于细胞活性生物标记物的BCOP方法预测洗发水、沐浴露、洁面类化妆品的眼刺激性[J]. 日用化学工业, 2021, 51(2): 109-114.

XIE Zhen,CHEN Shu-huai,LIU Lu,HE Li-cheng,SANG Jing,ZHU Yan-qin,KUANG Rong. Prediction of eye irritation of shampoos, shower gel and facial cleansers using Bovine Corneal Opacity and Permeability assay based on biomarkers of cell viability[J]. China Surfactant Detergent & Cosmetics, 2021, 51(2): 109-114.

图/表 6

表1

表2

图1

图2

表3

表4

参考文献 6

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编号	品名	编号	品名
1	婴儿沐浴露	8	洁面慕斯
2	沐浴露1	9	洗发水1
3	洁面乳1	10	洗发水2
4	洁面乳2	11	洗发水3
5	洁面泡沫	12	洗发水4
6	洁面啫喱	13	洗发水5
7	洁面膏	14	洗发水6

编号	浊度值	A	IVIS	UN GSH分类	Draize试验分类
阴性	0.278±0.481	0.008±0.007	0.394±0.539	不分类
阳性	21.273±3.258	0.660±0.141	31.178±5.302	2A或2B类
1	0	0.008±0.002	0.125±0.031	不分类	无刺激性
2	0.104±0.180	0.033±0.026	0.599±0.454	不分类	无刺激性
3	0	0.001±0.001	0.015±0.021	不分类	无刺激性
4	3.066±3.066	0.217±0.001	6.321±1.791	2A或2B类	轻刺激性
5	0	0.669±0.039	10.035±0.579	2A或2B类	微刺激性
6	3.259±2.070	0.413±0.180	9.459±4.579	2A或2B类	轻刺激性
7	0.248±0.367	0.244±0.007	3.913±0.394	2A或2B类	轻刺激性
8	3.109±1.195	1.084±0.058	19.369±1.974	2A或2B类	轻刺激性
9	0.926±0.503	0.316±0.014	5.354±0.502	2A或2B类	无刺激性
10	0.026±0.045	0.350±0.035	5.276±0.507	2A或2B类	无刺激性
11	0.053±0.091	0.872±0.047	13.133±0.608	2A或2B类	轻刺激性
12	0.229±0.396	0.070±0.021	1.279± 0.576	不分类	轻刺激性
13	2.163±1.265	0.911±0.264	15.823± 4.631	2A或2B类	轻刺激性
14	26.228±9.541	0.877±0.243	39.388±13.181	2A或2B类	中刺激性

编号	上皮DOI/%		基质DOI/%
编号	均值	方差	均值	方差
阴性	0	0	0	0
阳性	22.2	8.1	26.9	4.8
1	5.5	4.5	0	0
2	17.1	0.4	0	0
3	13.5	5.1	0	0
4	38.4	3.1	0	0
5	14.7	9	0	0
6	39.4	7.4	0	0
7	43.7	3.2	0	0
8	74.1	4.7	0	0
9	9.1	3.5	0	0
10	14.9	7	0	0
11	33.1	9.3	0	0
12	34.1	4.1	0	0
13	38.6	7.8	0	0
14	100	0	21.4	7.1

上皮DOI	基质DOI	分类
≤20%	0	无/微刺激性
>20%	0	轻刺激性
	>0	中刺激性

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基于细胞活性生物标记物的BCOP方法预测洗发水、沐浴露、洁面类化妆品的眼刺激性

Prediction of eye irritation of shampoos, shower gel and facial cleansers using Bovine Corneal Opacity and Permeability assay based on biomarkers of cell viability

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